docruДоктор.РуTitle1727-23782713-2994ООО "ГК "РУСМЕДИКАЛ"10.31550/1727-2378-2023-22-4-70-76docru-272Research ArticleЭНДОКРИНОЛОГИЯENDOCRINOLOGYУровни регуляторных Т-лимфоцитов и B-клеток у пациенток с болезнью Грейвса после тиреоидэктомииThe Levels of Regulatory T Lymphocytes and B Cells in Patients with Graves' Disease after Thyroidectomyhttps://orcid.org/0000-0002-2776-927XДудинаМ. А.DudinaM. A.

Дудина Маргарита Андреевна  — к. м. н., доцент кафедры госпитальной терапии и иммунологии с курсом; врач-эндокринолог 

660022, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 1

1 Partizan Zheleznyak Str., Krasnoyarsk,  660022; 3a Partizan Zheleznyak Str., Krasnoyarsk, 660022

margo85_@bk.ruhttps://orcid.org/0000-0002-1709-466XДогадинС. А.DogadinS. A.

Догадин Сергей Анатольевич — д. м. н., профессор кафедры госпитальной терапии и иммунологии с курсом ; заведующий эндокринологическим центром; главный внештатный эндокринолог  Минздрава Красноярского края

660022,  г. Красноярск, ул. Партизана Железняка,д. 3а

1 Partizan Zheleznyak Str., Krasnoyarsk,  660022; 3a Partizan Zheleznyak Str., Krasnoyarsk, 660022

sadogadin@gmail.comhttps://orcid.org/0000-0001-5829-672XСавченкоА. А.SavchenkoA. A.

Савченко Андрей Анатольевич — д. м. н., профессор, заведующий кафедрой физиологии имени профессора А.Т. Пшоника, заведующий лабораторией молекулярно-клеточной физиологии и патологии 

660022,  г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 3г

 3g Partisan Zheleznyakov Str., Krasnoyarsk,  660022

aasavchenko@yandex.ruhttps://orcid.org/0000-0003-2848-0846БеленюкВ. Д.BelenyukV. D.

Беленюк Василий Дмитриевич — к. б. н., научный сотрудник лаборатории молекулярно-клеточной физиологии и патологии

660022, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 3г. 

 3g Partisan Zheleznyakov Str., Krasnoyarsk,  660022

dyh.88@mail.ruhttps://orcid.org/0000-0002-4328-8054МаньковскийВ. А.MankovskyV. A.

Маньковский Владимир Анатольевич — хирург-эндокринолог 2-го хирургического отделения

 660022, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 3а. 

3a Partizan Zheleznyak Str., Krasnoyarsk, 660022

manvlad@inbox.ruhttps://orcid.org/0000-0002-9026-2615БорисовА. Г.BorisovA. G.

Борисов Александр Геннадьевич  — к. м. н., ведущий научный сотрудник лаборатории клеточно-молекулярной физиологии и патологии

660022, Российская Федерация, г. Красноярск, ул. Партизана Железняка, д. 3г. 

 3g Partisan Zheleznyakov Str., Krasnoyarsk,  660022

2410454@mail.ruФГБОУ ВО «Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого» Министерства здравоохранения Российской Федерации; КГБУЗ «Краевая клиническая больница»РоссияProf. V.F. Voino-Yasenetsky Krasnoyarsk State Medical University; Krasnoyarsk Regional Clinical HospitalRussian FederationФГБОУ ВО «Красноярский государственный медицинский университет имени профессора В.Ф. Войно-Ясенецкого» Министерства здравоохранения Российской Федерации; ФГБНУ «Федеральный исследовательский центр «Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук» обособленное подразделение «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера»РоссияProf. V.F. Voino-Yasenetsky Krasnoyarsk State Medical University; Scientific and Research Institute of Medical Problems of the North of the Federal Research Centre “Krasnoyarsk Scientific Centre of the Siberian Branch of the Russian Academy of Science”Russian FederationФГБНУ «Федеральный исследовательский центр «Красноярский научный центр Сибирского отделения Российской академии наук» обособленное подразделение «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера»РоссияScientific and Research Institute of Medical Problems of the North of the Federal Research Centre “Krasnoyarsk Scientific Centre of the Siberian Branch of the Russian Academy of Science”Russian FederationКГБУЗ «Краевая клиническая больница»РоссияKrasnoyarsk Regional Clinical HospitalRussian Federation202319022025224КАРДИОМЕТАБОЛИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА7076Copyright © Дудина М.А., Догадин С.А., Савченко А.А., Беленюк В.Д., Маньковский В.А., Борисов А.Г., 20252025Дудина М.А., Догадин С.А., Савченко А.А., Беленюк В.Д., Маньковский В.А., Борисов А.Г.Dudina M.A., Dogadin S.A., Savchenko A.A., Belenyuk V.D., Mankovsky V.A., Borisov A.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://docru.elpub.ru/jour/article/view/272Цель исследования

Цель исследования: изучить уровни регуляторных Т-лимфоцитов (Treg) и B-клеток в периферической крови у пациенток с болезнью Грейвса в динамике после тиреоидэктомии.

Дизайн

Дизайн: одноцентровое наблюдательное проспективное когортное открытое контролируемое исследование.

Материалы и методы

Материалы и методы. В исследование включены 96 пациенток с болезнью Грейвса, средний возраст — 42,86 ± 10,81 года. Клиникогормональное и иммунологическое обследование проводилось на фоне стойкого медикаментозного эутиреоза до операции, а также через 1, 3 и 6 месяцев после тиреоидэктомии. Уровни Treg и B-клеток в крови исследовали методом проточной цитометрии с использованием прямой иммунофлуоресценции и моноклональных антител. Уровень антител к рецепторам тиреотропного гормона (рТТГ) оценивали методом иммуноферментного анализа. Контрольную группу составили 85 здоровых женщин аналогичного возраста.

Результаты

Результаты. У пациенток с болезнью Грейвса в динамике послеоперационного периода происходило последовательное статистически значимое уменьшение титра антител к рТТГ: от 14,69 (8,67–19,81) до 0,81 (0,59–0,93) МЕ/л. Абсолютное количество Treg в крови у них было снижено относительно контрольных значений уже в дооперационном периоде и еще больше понизилось на 6-м месяце после тиреоидэктомии. Доли CD19+ CD5+ - и CD19+ CD5– -клеток у обследованных больных до операции были значительно выше, чем у женщин контрольной группы. Содержание CD19+ CD5+ -клеток уменьшилось уже через 1 месяц после тиреоидэктомии и сохранялось на уровне контрольных значений. Доля CD19+ CD27– -клеток у пациенток с болезнью Грейвса в дооперационном периоде была выше, чем у участниц контрольной группы, через 1 месяц после операции уменьшилась до контрольных значений и оставалась в данном диапазоне до конца наблюдения. Содержание CD19+ CD27+ -клеток у пациенток до операции оказалось ниже контрольного, в период 1–3 месяца соответствовало контрольным значениям, но на 6-м месяце после операции вновь уменьшилось.

Заключение

Заключение. Выявленные низкие уровни Treg и B-клеток памяти в периферической крови у пациенток с болезнью Грейвса через полгода после тиреоидэктомии свидетельствуют о сохранении у них в течение длительного времени регуляторных механизмов иммуносупрессивного состояния с повышением миграционной активности клеток иммунной системы. 

Aim

Aim: To study the levels of regulatory T lymphocytes (Treg) and B-cells in peripheral blood in patients with Graves' disease in dynamics after thyroidectomy.

Design

Design: Single center, observational, prospective, cohort, open, controlled study.

Materials and methods

Materials and methods. The study included 96 patients with Graves' disease, mean age 42.86 ± 10.81 years. Clinical, hormonal and immunological examinations were performed against the background of persistent drug-induced euthyroidism, before surgery, and also 1, 3, and 6 months after thyroidectomy. The levels of Treg and B-cells in the blood was examined by flow cytometry using direct immunofluorescence and monoclonal antibodies. The level of antibodies to thyroid-stimulating hormone receptors (rTSH) was assessed by enzyme immunoassay. The control group consisted of 85 healthy women of the same age.

Results

Results. In patients with Graves' disease in the dynamics of the postoperative period, there was a consistent statistically significant decrease in the titer of antibodies to rTSH: from 14.69 (8.67–19.81) to 0.81 (0.59–0.93) IU/l. The absolute amount of Treg in their blood was reduced relative to the control values already in the preoperative period and decreased even more at 6 months after thyroidectomy. The proportion of CD19+ CD5+ - and CD19+ CD5– -cells in the examined patients before surgery was significantly higher than in the control group. The content of CD19+ CD5+ cells decreased as early as 1 month after thyroidectomy and remained at the level of control values. The сontent of CD19+ CD27– -cells in patients with Graves' disease in the preoperative period was higher than in the control group, decreased to the control values 1 month after thyroidectomy and remained in this range until the end of the follow-up. The content of CD19+ CD27+ cells in patients before thyroidectomy was lower compare to control, in the period of 1–3 months it corresponded to the control values, but decreased again on the 6th month after surgery.

Conclusion

Conclusion. The reduction of Treg and B-memory cells in the peripheral blood in patients with Graves' disease six months after thyroidectomy remains of immunosuppressive regulatory mechanisms with an increase in the migration activity of immune cells for a long time. 

болезнь Грейвсатиреоидэктомиярегуляторные Т-лимфоцитыB-клетки памятитаргетная терапияGraves' diseasethyroidectomyregulatory T lymphocytesmemory B cellstarget therapyReferencesZhou F., Wang X., Wang L., Sun X. et al. Genetics, epigenetics, cellular immunology, and gut microbiota: emerging links with Graves' disease. Front. Cell Dev. Biol. 2022;9:794912. DOI: 10.3389/ fcell.2021.794912Zhou F., Wang X., Wang L., Sun X. et al. Genetics, epigenetics, cellular immunology, and gut microbiota: emerging links with Graves' disease. Front. Cell Dev. Biol. 2022;9:794912. DOI: 10.3389/ fcell.2021.794912Lang B.H.H., Woo Y.C., Chiu K.W.H. Two-year outcomes of single-session high- intensity focused ultrasound (HIFU) treatment in persistent or relapsed Graves'disease. Eur. Radiol. 2019;29(12):6690–8. DOI: 10.1007/s00330-019-06303-8Lang B.H.H., Woo Y.C., Chiu K.W.H. Two-year outcomes of single-session high- intensity focused ultrasound (HIFU) treatment in persistent or relapsed Graves'disease. Eur. Radiol. 2019;29(12):6690–8. DOI: 10.1007/s00330-019-06303-8Cao Y., Zhao X., You R., Zhang Y. et al. CD11c+ B cells participate in the pathogenesis of Graves' disease by secreting thyroid autoantibodies and cytokines. Front. Immunol. 2022;13:836347. DOI: 10.3389/fimmu.2022.836347Cao Y., Zhao X., You R., Zhang Y. et al. CD11c+ B cells participate in the pathogenesis of Graves' disease by secreting thyroid autoantibodies and cytokines. Front. Immunol. 2022;13:836347. DOI: 10.3389/fimmu.2022.836347Francis N., Francis T., Lazarus J.H., Okosieme O.E. Current controversies in the management of Graves' hyperthyroidism. Expert. Rev. Endocrinol. Metab. 2020;15(3):159–69. DOI: 10.1080/17446651.2020.1754192Francis N., Francis T., Lazarus J.H., Okosieme O.E. Current controversies in the management of Graves' hyperthyroidism. Expert. Rev. Endocrinol. Metab. 2020;15(3):159–69. DOI: 10.1080/17446651.2020.1754192Furmaniak J., Sanders J., Sanders P., Li Y. et al. TSH receptor specific monoclonal autoantibody K1-70TM targeting of the TSH receptor in subjects with Graves' disease and Graves' orbitopathy — results from a phase I clinical trial. Clin. Endocrinol. (Oxf). 2022;96(6):878–87. DOI: 10.1111/cen.14681Furmaniak J., Sanders J., Sanders P., Li Y. et al. TSH receptor specific monoclonal autoantibody K1-70TM targeting of the TSH receptor in subjects with Graves' disease and Graves' orbitopathy — results from a phase I clinical trial. Clin. Endocrinol. (Oxf). 2022;96(6):878–87. DOI: 10.1111/cen.14681Анкудинов А.С., Калягин А.Н., Мунир А.Р., Виджярагхаван Г. Влияние L-тироксина на липидный профиль пациентов с ишемической болезнью сердца на фоне гипотиреоза. Сибирское медицинское обозрение. 2020;2:30–5. DOI: 10.20333/2500136-2020-2-30-35Ankudinov A.S., Kalyagin A.N., Muneer A.R., Vijayaraghavan G. L-thyroxine influence on lipid profile of patients with ischemic heart disease on the background of hypothyroidism. Siberian Medical Review. 2020;2:30–5. (in Russian). DOI: 10.20333/2500136-2020-2-30-35Hamilton L.O.W., Lim A.E., Clark L.J. Total thyroidectomy for Graves' disease — what do our patients think? A qualitative cohort study to evaluate the surgical management of Graves' disease. Surgeon. 2020;18(4):193–6. DOI: 10.1016/j.surge.2019.09.005Hamilton L.O.W., Lim A.E., Clark L.J. Total thyroidectomy for Graves' disease — what do our patients think? A qualitative cohort study to evaluate the surgical management of Graves' disease. Surgeon. 2020;18(4):193–6. DOI: 10.1016/j.surge.2019.09.005Zhang X., Olsen N., Zheng S.G. The progress and prospect of regulatory T cells in autoimmune diseases. J. Autoimmun. 2020;111:102461. DOI: 10.1016/j.jaut.2020.102461Zhang X., Olsen N., Zheng S.G. The progress and prospect of regulatory T cells in autoimmune diseases. J. Autoimmun. 2020;111:102461. DOI: 10.1016/j.jaut.2020.102461Lane L.C., Cheetham T.D., Perros P., Pearce S.H.S. New therapeutic horizons for Graves' hyperthyroidism. Endocr. Rev. 2020;41(6):873– 84. DOI: 10.1210/endrev/bnaa022Lane L.C., Cheetham T.D., Perros P., Pearce S.H.S. New therapeutic horizons for Graves' hyperthyroidism. Endocr. Rev. 2020;41(6):873– 84. DOI: 10.1210/endrev/bnaa022Bartalena L., Piantanida E., Gallo D., Ippolito S. et al. Management of Graves' hyperthyroidism: present and future. Expert. Rev. Endocrinol. Metab. 2022;17(2):153–66. DOI: 10.1080/17446651.2022.2052044Bartalena L., Piantanida E., Gallo D., Ippolito S. et al. Management of Graves' hyperthyroidism: present and future. Expert. Rev. Endocrinol. Metab. 2022;17(2):153–66. DOI: 10.1080/17446651.2022.2052044Кудрявцев И.В., Субботовская А.И. Опыт измерения параметров иммунного статуса с использованием шестицветного цитофлуориметрического анализа. Медицинская иммунология. 2015;17(1):19–26. DOI: 10.15789/1563-0625-2015-1-19-26Kudryavtsev I.V., Subbotovskaya A.I. Application of six-color flow cytometric analysis for immune profile monitoring. Medical Immunology. 2015;17(1):19–26. (in Russian). DOI: 10.15789/1563-0625-2015-1-19-26Sutherland D.R., Ortiz F., Quest G., Illingworth A. et al. High-sensitivity 5-, 6-, and 7-color PNH WBC assays for both Canto II and Navios platforms. Cytometry B Clin. Cytom. 2018;94(4):637–51. DOI: 10.1002/cyto.b.21626Sutherland D.R., Ortiz F., Quest G., Illingworth A. et al. High-sensitivity 5-, 6-, and 7-color PNH WBC assays for both Canto II and Navios platforms. Cytometry B Clin. Cytom. 2018;94(4):637–51. DOI: 10.1002/cyto.b.21626Nalla P., Young S., Sanders J., Carter J. et al. Thyrotrophin receptor antibody concentration and activity, several years after treatment for Graves' disease. Clin. Endocrinol. (Oxf). 2019;90(2):369–74. DOI: 10.1111/cen.13908Nalla P., Young S., Sanders J., Carter J. et al. Thyrotrophin receptor antibody concentration and activity, several years after treatment for Graves' disease. Clin. Endocrinol. (Oxf). 2019;90(2):369–74. DOI: 10.1111/cen.13908El Kawkgi O.M., Ross D.S., Stan M.N. Comparison of long-term antithyroid drugs versus radioactive iodine or surgery for Graves' disease: a review of the literature. Clin. Endocrinol. (Oxf). 2021;95(1):3–12. DOI: 10.1111/cen.14374El Kawkgi O.M., Ross D.S., Stan M.N. Comparison of long-term antithyroid drugs versus radioactive iodine or surgery for Graves' disease: a review of the literature. Clin. Endocrinol. (Oxf). 2021;95(1):3–12. DOI: 10.1111/cen.14374Kahaly G.J., Diana T., Olivo P.D. TSH receptor antibodies: relevance & utility. Endocr. Pract. 2020;26(1):97–106. DOI: 10.4158/EP-2019- 0363Kahaly G.J., Diana T., Olivo P.D. TSH receptor antibodies: relevance & utility. Endocr. Pract. 2020;26(1):97–106. DOI: 10.4158/EP-2019- 0363Maurer E., Maschuw K., Reuss A., Zieren H.U. et al. Total versus neartotal thyroidectomy in Graves disease: results of the randomized controlled multicenter TONIG-trial. Ann. Surg. 2019;270(5):755– 61. DOI: 10.1097/SLA.0000000000003528Maurer E., Maschuw K., Reuss A., Zieren H.U. et al. Total versus neartotal thyroidectomy in Graves disease: results of the randomized controlled multicenter TONIG-trial. Ann. Surg. 2019;270(5):755– 61. DOI: 10.1097/SLA.0000000000003528Qin J., Zhou J., Fan C., Zhao N. et al. Increased circulating Th17 but decreased CD4+ Foxp3+ Treg and CD19+ CD1dhiCD5+ Breg subsets in new-onset Graves' disease. Biomed. Res. Int. 2017;2017:8431838. DOI: 10.1155/2017/8431838Qin J., Zhou J., Fan C., Zhao N. et al. Increased circulating Th17 but decreased CD4+ Foxp3+ Treg and CD19+ CD1dhiCD5+ Breg subsets in new-onset Graves' disease. Biomed. Res. Int. 2017;2017:8431838. DOI: 10.1155/2017/8431838Zhang R., Miao J., Zhu P. Regulatory T cell heterogeneity and therapy in autoimmune diseases. Autoimmun. Rev. 2021;20(5):102715. DOI: 10.1016/j.autrev.2020.102715Zhang R., Miao J., Zhu P. Regulatory T cell heterogeneity and therapy in autoimmune diseases. Autoimmun. Rev. 2021;20(5):102715. DOI: 10.1016/j.autrev.2020.102715Liu H.Y., Shi Z.Y., Fan D., Zhang S.X. et al. Absolute reduction in peripheral regulatory T cells in patients with Graves' disease and post-treatment recovery. Mol. Immunol. 2022;144:49–57. DOI: 10.1016/j.molimm.2022.02.004Liu H.Y., Shi Z.Y., Fan D., Zhang S.X. et al. Absolute reduction in peripheral regulatory T cells in patients with Graves' disease and post-treatment recovery. Mol. Immunol. 2022;144:49–57. DOI: 10.1016/j.molimm.2022.02.004Дудина М.А., Догадин С.А., Савченко А.А., Беленюк В.Д. Фенотипический состав Т-лимфоцитов периферической крови у пациентов с болезнью Грейвса при консервативной терапии тиамазолом. Проблемы эндокринологии. 2021;67(6):39– 49. DOI: 10.14341/probl12812Dudina M.A., Dogadin S.A., Savchenko A.A., Belenyuk V.D. T-lymphocytes phenotypic composition of peripheral blood in patients with Graves’ disease undergoing conservative therapy with thiamazole. Problems of Endocrinology. 2021;67(6):39–49. (in Russian). DOI: 10.14341/probl12812Segundo C., Rodríguez C., García-Poley A., Aguilar M. et al. Thyroidinfiltrating B lymphocytes in Graves' disease are related to marginal zone and memory B cell compartments. Thyroid. 2001;11(6):525– 30. DOI: 10.1089/105072501750302813Segundo C., Rodríguez C., García-Poley A., Aguilar M. et al. Thyroidinfiltrating B lymphocytes in Graves' disease are related to marginal zone and memory B cell compartments. Thyroid. 2001;11(6):525– 30. DOI: 10.1089/105072501750302813Morris G., Puri B.K., Olive L., Carvalho A.F. et al. Emerging role of innate B1 cells in the pathophysiology of autoimmune and neuroimmune diseases: association with inflammation, oxidative and nitrosative stress and autoimmune responses. Pharmacol. Res. 2019;148:104408. DOI: 10.1016/j.phrs.2019.104408Morris G., Puri B.K., Olive L., Carvalho A.F. et al. Emerging role of innate B1 cells in the pathophysiology of autoimmune and neuroimmune diseases: association with inflammation, oxidative and nitrosative stress and autoimmune responses. Pharmacol. Res. 2019;148:104408. DOI: 10.1016/j.phrs.2019.104408She Z., Li C., Wu F., Mao J. et al. The role of B1 cells in systemic lupus erythematosus. Front. Immunol. 2022;28(13):814857. DOI: 10.3389/fimmu.2022.814857She Z., Li C., Wu F., Mao J. et al. The role of B1 cells in systemic lupus erythematosus. Front. Immunol. 2022;28(13):814857. DOI: 10.3389/fimmu.2022.814857Smith M.J., Rihanek M., Coleman B.M., Gottlieb P.A. et al. Activation of thyroid antigen-reactive B cells in recent onset autoimmune thyroid disease patients. J. Autoimmun. 2018;89:82–9. DOI: 10.1016/j.jaut.2017.12.001Smith M.J., Rihanek M., Coleman B.M., Gottlieb P.A. et al. Activation of thyroid antigen-reactive B cells in recent onset autoimmune thyroid disease patients. J. Autoimmun. 2018;89:82–9. DOI: 10.1016/j.jaut.2017.12.001

The authors declare that there are no conflicts of interest present.